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免疫学课件

  • 素材大小:8.82 MB
  • 素材授权:免费下载
  • 更新时间:2017-05-16
  • 素材类别:医疗健康ppt
  • 素材格式:.ppt
  • 关键提要:免疫学
  • 素材版本:PowerPoint2003及以上版本(.ppt)
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这是免疫学课件,包括了免疫细胞及其功能的检测,免疫分子的检测,免疫相关基因的检测,免疫学检测的临床应用等内容。

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免疫学课件

PPT内容


免疫学检测技术
纲要
免疫细胞及其功能的检测
免疫分子的检测
免疫相关基因的检测
免疫学检测的临床应用
第一节 免疫细胞及其亚群的检测
免疫细胞及亚群的分离、鉴定与计数
单核-吞噬细胞功能测定
T淋巴细胞功能测定
B淋巴细胞功能测定
NK细胞功能测定
(二)淋巴细胞及其亚群的分离
免疫吸附分离法 
磁珠分离法(immune magnetic bead,IMB)
流式细胞术(flow cytometry,FCM)
尼龙毛分离法
E花环沉降法
抗原肽-MHC分子四聚体技术
抗原肽-MHC分子四聚体技术
(三)单核-吞噬细胞分离
体外:Percoll连续密度梯度离心法
平皿黏附法分离(阳性分选)
体内:斑蝥敷贴法等
(四)免疫细胞的计数
1. T细胞检测
间接免疫荧光法
免疫组织化学法
葡萄球菌花环法
微量细胞毒试验
2. B细胞检测
膜表面免疫球蛋白(mIg)检测
间接免疫荧光法
细胞亚群检测  
二、免疫细胞功能测定
单核-吞噬细胞功能测定
T淋巴细胞功能测定
B淋巴细胞功能测定
NK细胞功能测定
(一)单核-吞噬细胞功能测定
巨噬细胞吞噬功能测定 
巨噬细胞胞毒作用测定 
中性粒细胞趋化功能测定
中性粒细胞吞噬、杀菌功能测定  ①中性粒细胞噬菌试验② 硝基蓝四氮唑③化学发光试验
(二)T细胞功能测定
T淋巴细胞增殖试验
T细胞介导的细胞毒试验
T细胞分泌功能测定
流式细胞术对T细胞功能的检测 
T细胞功能的体内试验 :包括接触性超敏反应、移植物抗宿主反应(GVHR)、迟发型超敏反应(DTH) 等
1. T淋巴细胞增殖试验
形态学方法 
放射性核素掺入法
MTT法 
抗TCRV等位基因片段产物检测法
CFSE标记技术
淋巴细胞增殖实验: 放射性核素掺入法
T细胞介导的细胞毒试验
T细胞功能的体内试验
迟发型超敏反应(DTH):
结核菌素反应
(三) B淋巴细胞功能测定
B细胞增殖(转化)试验
溶血空斑形成试验
酶联免疫斑点法(ELISPOT)
(四) NK细胞功能试验
放射性核素51Cr、125I-UdR释放法
乳酸脱氢酶释放法 
形态学检测
化学发光法
酶联免疫斑点试验(enzyme-Linked immonospot assay,ELISPOT)
第二节 免疫分子的检测
抗原抗体的检测
补体的的检测
细胞因子及其受体的检测
一、抗原抗体的检测
抗原抗体检测的原理与基本特点
影响抗原抗体反应体系的因素
抗原、抗体检测的方法
沉淀反应
凝集反应
补体参与抗原抗体反应
免疫标记技术
蛋白质芯片技术
(一)抗原抗体检测的原理与基本特点
抗原抗体检测的原理
          抗原与相应抗体可发生特异性结合,并在外界条件影响下出现肉眼可见或借助仪器可检测的各种现象,如凝集或沉淀。借此可用已知抗体(或抗原)检测未知抗原(或抗体),因所采用的抗体常存在于血清中,故称为血清学反应。
抗原抗体检测的原理与基本特点
基本特点
特异性和交叉反应
可逆性
可见性与带现象
反应的阶段性
可见性与带现象
(二) 影响抗原抗体反应体系的因素
适宜的抗原抗体浓度和比例
反应时间
电解质
温度
酸碱度
(三)抗原、抗体检测的方法
沉淀反应
凝集反应
补体参与抗原抗体反应
免疫标记技术
蛋白质芯片技术
2. 凝集反应
直接凝集
间接凝集
抗球蛋白实验
4. 免疫标记技术
免疫荧光技术①免疫荧光显微技术a.直接荧光法b.间接荧光法②流式细胞术
酶免疫测定①联免疫吸附试验②酶免疫组织化学技术
放射免疫分析法①液相法②固相法
免疫胶体金技术
化学发光免疫技术
免疫印迹法该法
(4)免疫印迹法(immunoblotting)
5.蛋白质芯片技术
免疫学测定方法敏感性比较
二、补体的检测
补体总活性测定常采用50%补体溶血法(CH50)
某补体成分的具体含量可用单向免疫扩散法、火箭免疫电泳、免疫比浊法(透射比浊法和散射比浊法)ELISA、RIA等方法
三、细胞因子及受体的检测
生物学活性检测法:测定细胞因子相关的生物学活性
免疫学检测法:以细胞因子为抗原的检测法
分子生物学方法:用基因的技术检测细胞因子含量以及预测合成量
细胞因子受体检测的基本技术
(一)生物学活性检测法
促进细胞增殖和增殖抑制法
抗病毒活性测定法 
靶细胞杀伤法
趋化活性测定法
(二)免疫学检测法
分泌性细胞因子检测 
胞内细胞因子检测
(三)分子生物学方法 
RNA印迹法
核酸酶保护分析
原位杂交
PCR和Real Time PCR等。
        亦可通过检测细胞内细胞因子的基因组成或mRNA量,推算出细胞因子的合成量。
(四)细胞因子受体检测的基本技术
检测方法目前大多采用间接荧光、FCM检查其在细胞膜上的分布和测定某些样品中的含量
第三节 免疫相关基因的检测
一、 BCR和TCR克隆性基因重排分析
Southern印迹杂交法
PCR扩增技术
二、 HLA等位基因分型技术
序列特异性寡核苷酸探针
单链构象多态性PCR ( PCR-SSCP )
序列特异性引物
其他技术
第四节 免疫学检测的临床应用
认识、阐明相关疾病发病机制
诊断、辅助诊断相关疾病
免疫功能检测与监视
一、认识、阐明相关疾病发病机制
二、诊断、辅助诊断相关疾病
(一)用已知抗体检测未知抗原
检测病原体及其抗原组分
肿瘤抗原的定性、分型、定量与定位
HLA分型、红细胞血型抗原
(二)用已知抗原检测未知抗体
病原特异性抗体
变应原抗体
自身抗体   
细胞毒抗体
三、免疫功能检测与监视
体液免疫功能:免疫球蛋白、B细胞数量与功能.
细胞免疫功能:T细胞总数与亚群 、T细胞功能  
①非特异性增殖反应:
②对特异性抗原的T细胞增殖反应
③细胞介导的细胞毒试验
④测定T细胞产生的细胞因子
细胞因子(及其受体)和黏附分子水平
非特异性免疫功能
免疫学检测技术不仅用于疾病的诊断与辅助诊断,也可以通过机体免疫功能检测与监视了解疾病的病程变化、观察疗效、判断预后。
 

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